1.1材料
实验用鱼为眼球白浊、头部发黑的大菱鲆鱼(体长15 cm,体重50~70 g),经鳃部镜检确诊为感染盾纤毛虫,此虫经染色后在显微镜下观察略显黑色。
1.2药物
自中药店采购苦参、大黄、百部、贯众、柴胡、五倍子,单独粉碎成末,以18:12:20:15:10:15的比例混合。
1.3实验方法
实验分三组。每组随机取病鱼10尾。放入100 L玻璃缸中,连续充氧曝气,每组浸浴浓度为10 mg/L 、15 mg/L 、20 mg/L。记录实验开始时间,并随时观察鱼的反应。准备干净无划痕的凹玻片,用剪刀剪取鳃丝置于其上,在光学显微镜下观察虫体变化情况。
2 结果
2.1肉眼观察到的现象
大菱鲆鱼在10 mg/L的中草药合剂中浸泡后,盾纤毛虫的杀灭效果并不明显。经12小时后,虫体游动仍活泼;在15 mg/L的中草药合剂中浸泡,1小时后,可见部分虫体从鳃丝脱落,死亡。2小时后,先头部发黑,后逐渐变白,鳃丝上已见不到盾纤毛虫。浸浴的鱼在10天内未出现任何异常现象;在20 mg/L的中草药合剂浸泡,半小时后,部分鱼开始上窜,呼吸频率加快;两小时后,两尾鱼死亡,镜检鳃丝充血,盾纤毛虫体死亡。
2.2 显微镜下虫体的变化
在凹玻片上滴洒10 mg/L 、15 mg/L 、20 mg/L的药液,自感染盾纤毛虫的大菱鲆鱼体上分离到盾纤毛虫虫体,用吸管将虫体吸于凹玻片上,显微镜下观察虫体的变化。
浓度为10 mg/L的药液对盾纤毛虫的作用较弱,6小时后,未发现死亡虫体,活力不减弱。
在浓度为15 mg/L的药液中的虫体,15分钟后颜色变浅,并挤成一团,纤毛摆动速度加快。30分钟后,纤毛停止摆动,显微结构模糊。1小时后,虫体结构完全被破坏,胞质流出,凝固。
在浓度为20 mg/L的药液中的虫体,5分钟后虫体结构即完全被破坏,胞质流出,凝固。